↑6月13日，医生在显微镜下对将要进行冷冻的受精卵胚胎，进行处理液浸泡的预处理。南都记者谭庆驹摄
6月13日，广州医科大学第三附属医院辅助生殖技术实验室里，医生在电子显微镜下观察即将冷冻储藏的受精卵胚胎。 南都记者 谭庆驹 摄12年前，33岁产妇利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩，多余的11个胚胎被冷冻储藏。受益于全面二孩政策，其中3枚冷冻胚胎在广州医科 大学附属第三医院生殖医学中心，被成功唤醒，并植入产妇体内。经历减胎等程序后，45岁的产妇如今已成功怀孕12周。据悉，冷冻如此长时间后复苏、植入， 该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝。
12年前获得13个有效健康胚胎
医院生殖医学中心副主任医师 许海燕介绍，来自罗定的朱女士，因为双侧输卵管堵塞，婚后多年不育。2004年3月，曾在广医三院接受过试管婴技术操作，同年12月成功诞生一个健康男 婴。当年，朱女士一共取得19个健康卵子细胞。在与其丈夫的精子结合后，获得了13个有效健康的胚胎。“当时植入了两个胚胎，成功生下男孩后，朱女士剩余 的11个健康胚胎被冷冻保存了起来”，许海燕介绍，和当时许多已经成功分娩的试管婴操作夫妻一样，朱女士成功有了一个孩子后，对于剩下的11个封存胚胎没 有太过留意。
全面二孩政策后，许多被当初父母遗忘的小胚胎，纷纷被回想起来，被大量地解冻、复苏，植入母体。今年3月，45岁的朱 女士，决定尝试生育二孩。万幸的是，在没有缴费保存的情况下，医院一直为这11个小生命提供冷冻保存服务。这些“小家伙”依然静静地呆在零下200多摄氏 度的液氮罐中，等待复苏的机会。随后，朱女士主动续缴了积欠的105个月保管费用。
7个冷冻胚胎3个符合植入要求
根据基本信息，中心医护人员成功找到了朱女士当时冻存的“胚胎”，用复苏技术为冷冻胚胎注水、唤醒。通过显微镜、肉眼来观察复苏胚胎的形态，并据此甄别胚胎的健康程度。“所取的7个胚胎中，有3个形态饱满、正常，符合植入的相关要求。”
许 海燕表示，广医三院从2001年开始提供冷冻胚胎相关的保存服务。在21世纪初期，生殖医学领域还没有发现玻璃化冷冻技术时，所采取的是机械程式化冷冻方 式。统计显示，在使用老旧脱水、冷冻方法时，其解冻复苏的成功率约为60%。在澳洲专家发明玻璃化冷冻技术，能够在短短数秒时间内完成胚胎、生殖细胞的快 速冷冻后，相关的复苏成功率则达到95%以上。“目前，我们中心每月进行的约600个周期的胚胎植入中，完全适用新鲜胚胎进行植入只有200例左右。使用 冷冻胚胎植入的冰宝宝则达到300-400例，每月解冻的冰宝宝数就有近千个。冷冻胚胎植入后的成功抱婴回家率，和新鲜胚胎并没太大差异。”
考虑高龄因素三胞胎减至一胎
获 得了三个唤醒的胚胎后，许海燕很快安排了为朱女士进行胚胎植入手术。术后15天左右的观察，三个12年前的胚胎依然保持着旺盛的生命力，全部存活。朱女士 已是45岁的高龄，成了此次二孩分娩的最大障碍。“从优生优育的角度来看，女性怀孕的年龄越大，胚胎异常发生的几率就越大，而且怀孕后流产率高，承担着非 常大的风险。”
许海燕在历次门诊随访中，都建议患者减胎。朱女士也不想在如此高龄，承担三倍于常规怀孕的压力，选择将三胞胎减少到 一胎。6月8日进行了减胎操作，13日又进行了减胎手术后的多次影像观察。“这次手术进行的非常成功，由于患者使用的是12年前更为年轻、活力的冷冻胚 胎，本身发生染色体异常的几率就要低许多。再考虑到患者目前已经过了流产高风险期，朱女士这次成功分娩二孩的几率很高”，医院产前诊断专家陈敏表示，这也 意味着大约六个月后，朱女士将有可能分娩我国冻存时间最长的一个冰宝宝。
释疑
冰封12年“冰宝宝”健康吗？
在 接近绝对零度的极低温度下待了这么长时间，冰宝宝的健康状况，是否会比新鲜胚胎要差些呢？目前国际、国内的相关研究还在进行，毕竟试管婴技术从1978年 才面世，迄今不到40年。使用冷冻胚胎进行操作的相关技术，开展的时间更短。截至目前，医学界还没有发现使用冷冻胚胎的冰宝宝在成长过程中，在智力、发育 等领域会表现出与新鲜胚胎上的差异。如同试管婴儿技术孕育的孩子，并不比普通孩子更笨、更弱一样。
不仅如此，由于冷冻胚胎的形成时 间，往往处于父母更年轻的时段，其发生遗传变异的可能性反而更低。如果一名女性在30岁前取出卵细胞进行受精，然后将胚胎进行冷冻保存。在35岁后再移植 怀孕，那么，这个来自于30岁身体的卵细胞，极可能会比高龄时发育的卵细胞缺陷率低。许海燕主任表示，女性年龄越大，异常卵子产生的比例越高，胚胎异常比 例及畸形胎率也就越高，流产的比例也相当大。以朱女士为例，其33岁时冻存的胚胎，发生唐氏综合征等染色体异常疾病的风险极低，但如果是45岁再来取卵做 胚胎，其发生染色体异常的风险则高达80%以上。年轻时的冷冻胚胎较高龄时获得的新鲜胚胎大多数质量会好一些。
揭秘
“唤醒”冷冻胚胎在模拟人体环境待4小时
随 着近期发明应用的玻璃化冷冻技术的发展，胚胎快速冷冻、解冻成功率已大大提升。广州医科大学第三附属医院生殖助孕中心实验室杜红姿主任表示，胚胎的冷冻， 关键是脱水和注水的相关细节需要处理好。构成细小胚胎的内容物中，除了各类生命物质，其余最主要的就是水，它们在冷冻卵子的过程中，成了最需要克服的瓶 颈。
对胚胎进行脱水冷冻，先将其放置到细胞培养液和专业器皿中30分钟左右，随后一种脱水试剂“上场”。这种试剂已被证实，在脱水 过程中对胚胎的安全危害性极小。先用浓度低、渗透压低的试剂，胚胎开始快速脱水；再上浓度高、渗透压力高的试剂，让脱水过程可控，保留一定水分。随后，在 1秒钟内让脱水后的胚胎由室温降低到零下196℃。细胞内的液体不再是冰晶，而是玻璃化的固态物质，对胚胎的损害也就降到较低水平。而让冷冻胚胎快速复活 的过程，则是将上述昂贵试剂的浓度由高向低进行反向操作。随后，生殖医学专家将这些复苏的胚胎，放置在37℃、二氧化碳浓度6%、湿度95%以上的培养液 中待上4个小时。在模拟出来的人体环境待上足够长时间后，感觉回到熟悉环境的胚胎才终于“满血复活”。之后，能否成功分娩出试管婴儿，就要看胚胎质量、生 殖系统状况等因素了。
知多D
国外有冻龄16年的冰宝宝
冷冻胚胎和生殖细胞精子、卵子 的技术，最早是为了满足畜牧业对珍稀动物的保护和配种用途。它真正第一次应用于人工辅助生殖技术，是1986年的事情。其中尤以卵子细胞冷冻、解冻最为复 杂，当时澳大利亚专家第一次复苏了冷冻卵子，并成功形成胚胎、受孕，最后诞生了第一个被称为“冰宝宝”(又被称为“时光婴儿”)的通过冰冻卵子孕育的试管 婴儿。当时的专家发现，冻卵的复苏率很低，做试管婴儿时的成功率也远低于新鲜卵子。直到发明快速脱水和极速冷冻方法，卵子冷冻复苏问题 才 得到 有 效 解 决 ，也带 动 了 胚胎冷冻复苏的成功率提高。广医三院生殖医学中心主任刘见桥表示，根据检索，此前中国冻龄最长的一位冰宝宝，是去年青岛为一名 47岁患者植入的冻龄10年的胚胎。而在英国、澳大利亚等国家和地区，冻龄超过16年的冰宝宝也时有出现。
出品：南方都市报科学新闻工作室
主持：陈养凯
采写：南都记者 王道斌 通讯员 黄贤君 白恬
摄影：南都记者 谭庆驹
